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分享一篇2022年9月发表在Front Physiol(IF:4.755)的文章《Identification of hub genes associated with acute kidney injury induced by renal ischemia-reperfusion injury in mice》(PMID: 36246123),作者通过对基因表白数据的综合剖析,为缺血再灌注伤害-急性肾伤害的发病机制提供新的潜在生物标志物和见解。该思路同样实用于其余非肿瘤或肿瘤的钻研。

背景&办法
背景:

急性肾伤害(AKI)是一种重大的临床综合征,缺血再灌注伤害(RI)是急性肾伤害的重要病因。

办法:

1.对数据集进行归一化解决;

2.别离鉴定两个个数据集中的差别表白基因;

3.DEG的GO性能和KEGG通路富集剖析;

4.DEG的基因集富集剖析;

5.DEG的PPI网络构建与hub基因的鉴定;

6.转录因-hub基因网络和miRNA-hub基因网络的构建;

7.hub基因相互作用药物的辨认;

8.IRI-AKI病hub基因表白程度。

后果
差别表白基因的鉴定

从GSE39548数据集中共筛选出1580个DEG,其中IRI组上调784个,下调796个。在GSE131288数据集中,共筛选出992个DEG,其中在IRI组中表白上调的有686个,下调的有306个。两个数据集的DEG取交加,失去323个独特DEG,其中在IRI组中上调的有260个,下调的有63个。


323个DEG的GO和KEGG路径富集剖析

利用DAVID数据库,确定了这323个DEG的潜在性能。

基因集富集剖析(GSEA)

采纳C2中的CP基因集作为背景基因集,进行GSEA剖析。此外,还利用KEGG-MAP数据库绘制了与缺血-再灌注伤害相干的4条信号通路。



蛋白质-蛋白质相互作用网络的构建与hub基因的鉴定

将上述剖析失去的323个独特差别表白基因输出STRING数据库,并将所得后果导入Cytoscape软件构建PPI网络。此外,利用cytoHubba插件计算节点连贯的紧密度,确定前10个基因为hub基因,别离为Jun、Stat3、Myc、Cdkn1a、Hif1a、Fos、Atf3、Mdm2、Egr1、dit3。

转录因-hub基因网络和miRNA-hub基因网络的构建

咱们旨在更好地理解hub基因在AKI发病机制中的调节作用。应用STRUST数据库预测了34个可能与10个枢纽基因相互作用的TF,并构建TF-hub基因调控网络。通过starBase数据库预测了能够与10个hub基因相互作用的miRNA,并构建miRNA-hub基因相互作用网络

辨认与hub基因相互作用的潜在药物

应用DGIdb数据库对可能与hub基因相互作用的药物或分子化合物进行了预测,共筛选出299种可能与hub基因存在调控关系的药物或分子化合物,其中与HIF1A相互作用的药物数量最多。

IRI-AKI病hub基因表白程度

在GSE39548数据集中,IRI-AKI组的10个hub基因的表白显著高于对照组。同样,在GSE131288数据集中,IRI-AKI组中有10个hub基因的表白显著减少。

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